微(wēi)量DNA快(kuài)速回收試劑盒

産品簡介

微(wēi)量DNA快(kuài)速回收試劑盒适合從(cóng)TAE、TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA；也(yě)适合從(cóng)各種DNA反應液中回收DNA，能(néng)有(yǒu)效去(qù)除酶蛋白(bá∑∏'​i)、引物(wù)、引物(wù)二聚體(tǐ)£"₩、單核苷酸、染料和(hé)無機(jī)鹽等雜(zá)質。獲得(de)的(deβ∞)DNA适用(yòng)于酶切、連接、PCR和(hé)測序等分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物(wù)∑₩§學實驗。

方法簡便，隻需溶膠或調整結合條件(jià™‍≤∏n)→結合→洗滌→甩幹乙醇→洗脫5個(gè)步驟。以平行(xíng)處理(lǐ)4個(gè)樣品為(wèi)例，從(cóng)瓊脂糖凝膠中回收DNA隻需20分(fēn)鐘(zhōng)；從(cóng)PCR産物(wù)中回收DNA隻需10分(fēn)鐘(zhōng)。

有(yǒu)效回收DNA長(cháng)度範圍100 bp-15 kb，最大(dà)回收量4 μg，回收率為(wèi)60-90%，最小(xiǎo)洗脫體(tǐ)積15 μl。

有(yǒu)效回收量與起始樣品量

   本試劑盒有(yǒu)效回收量為(wèi)""0.5-4 μg雙鏈DNA。起始目的(de)DNA量偏高(gāo)或偏低(dī)都(dōu)會(huì)降低('₩δγdī)回收率。

PCR産物(wù)估算(suàn)方法：通(tōng)常PCR體(tǐ)系中上(shàng)下(xià)遊引物(wù)濃度各0.2 μM，理(lǐ)想條件(jiàn)下(xià)50%引物(wù)轉化(huà)為(wèi)目的(de)産物(wù)，即0.1 μM；

100 bp目的(de)産物(wù)為(wèi)6.6 ng/μl；500 bp目的(de)産物(wù)為(wèi)33 ng/μl；1 kb目的(de)産物(wù)為(wèi)66 ng/μl，以此類推。

   質粒酶切産物(wù)估算(suàn)方法：目的(de)DNA量= 起始質粒DNA量 × 酶切後目的(de)DNA長(cháng)度 ÷ 質粒DNA長(cháng)度

質粒DNA的(de)純度、構型和(hé)酶切效率會(σ✘÷huì)影(yǐng)響起始DNA量的(de)估算(suàn)。

産品特點

(一(yī))通(tōng)用(yòng)

适合從(cóng)TAE、TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA；

适合從(cóng)各種DNA反應液中回收DNA，能(néng)有(yǒu)效去(qù)除酶蛋白(bái)、引物(w÷≥™≠ù)、引物(wù)二聚體(tǐ)、單核苷酸、染料和(h€←π₹é)無機(jī)鹽等雜(zá)質。

(二)穩定

回收率與目的(de)DNA長(cháng)度和(hé)起始量有(yǒu)關，但(dàn)“&‌回收率不(bù)穩定”通(tōng)常與凝膠種類、凝膠→​濃度和(hé)凝膠重量有(yǒu)關。我們考察了(≥£₽←le)上(shàng)述因素，使用(yòng)DK404均可(kě)獲得(de)穩定的(de)回收率，見(jiàn)下(xià)圖。

以1 μg 500 bp DNA片段為(wèi)起始樣品，使用(yòng)DK404回收目的(de)DNA的(de)回收率：

(三)方便

方法簡便，見(jiàn)操作(zuò)流程。以平行(x∞¥€>íng)處理(lǐ)4個(gè)樣品為(wèi)例，從(cóng≈ ")瓊脂糖凝膠中回收DNA隻需20分(fēn)鐘(zhōng)；從(cóng)PCR産物(wù)中回收DNA隻需10分(fēn)鐘(zhōng)。