本公司提供的(de)耐熱(rè)DNA聚合酶徹底去(qù)除宿主基因組DNA和(hé)表達載體(tǐ)DNA，避免由于酶本身(shēn)的(de)DNA殘留而導緻的(de)假陽性；優化(huà)Buffer體(tǐ)系，提高(gāo)了(le)PCR的(de)靈敏度和(hé)特異性。

下(xià)表為(wèi)三種耐熱(rè)DNA聚合酶的(de)基本特性：    

5'→3'外(wài)切酶活性：延伸至配對(duì)雙鏈區(qū)時(shí)延伸受阻，此時(shí)新 "¥合成的(de)互補鏈上(shàng)形成“切刻”，5'→3'外(wài)切酶活性被激活：水(shuǐ)解“切刻”5' 堿基，同時(shí)在“切刻”3' 合成新的(de)堿基，此過程稱為(wèi)“切刻平π↕✔←移”。Taqman探針法Realtime PCR正是(shì)利用(yòng)Taq 5'→3'外(wài)切酶活性水(shuǐ)解探針，釋放(f♥γ©♦àng)熒光(guāng)信号。

3'→5'外(wài)切酶活性：PCR延伸過程嵌入錯(cuò)配堿基時(shí)延伸受阻，3'→5'外(wài)切酶活性被激活：切除錯(cuò)配堿☆§基，繼續延伸。但(dàn)是(shì)3'→5'外(wài)切酶活性無法切除dUTP，并且pfu無法脫落，因此dUTP是(shì)pfu的(de)不(bù)可(kě)逆抑制(zhì)劑。dCTP會(huì)緩慢(màn)脫氨産生(shēng)dUTP，反複凍融會(huì)加劇(jù)此過程，因此應Ω↔±$盡可(kě)能(néng)小(xiǎo)體(tǐ)積分(fēn)裝dNTP以減少(shǎo)反複凍融次數(shù)。

突變與保真性：随機(jī)突變:Taq無3'→5'外(wài)切酶活性，延伸過程嵌入錯(cα₩uò)配堿基時(shí)大(dà)多(duō€<©)數(shù)情況是(shì)延伸終止，但(dàn)有(yǒu)一(yī)定的(de)概率延伸可(kě)以繼續&∞，産生(shēng)随機(jī)突變。pfu和(hé)Taq Plus具有(yǒu)3'→5'外(wài)切酶活性，能(néng)避免因嵌入錯(cuò)配堿基造成的(de£Ω)随機(jī)突變。

    ↓✔©‌;       &πα₹'nbsp;   &↓¥§nbsp;   γ•   C:G→T:A突變:DNA鏈中的(de)胞嘧啶(C)會(huì)緩慢(màn)脫氨為(wèi)尿嘧啶(U)，從(cóng)而産生(shēng)C:G→T:A突變，高(gāo)溫會(huì)加劇(jù)此過程，使用↕β(yòng)pfu或者Taq Plus無法避免這(zhè)種突變。因此，應盡可(kě)能​♣(néng)使用(yòng)較少(shǎo)的(de)循環數(λ♦•shù)，以減少(shǎo)DNA鏈中C→U轉化(huà)比例，從(cóng)而減少(shǎo)C:G→T:A突變。

PCR産物(wù)末端加A：延伸結束後，Taq在合成産物(wù)的(de)3' 額外(wài)添加A形成粘末端，後者可(kě)以與T載體(tǐ)3' T配對(duì)。