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植物(wù)RNA小(xiǎo)量提取試劑盒
産品簡介:
植物(wù)RNA小(xiǎo)量提取試劑盒,适合從(cóng)≤100 mg植物(wù)樣品中提取RNA。
本試劑盒采用(yòng)優化(huà)的(d≈®e)裂解液Buffer RL快(kuài)速裂解細胞釋放(fàng)RNA,配合β-巯基乙醇迅速滅活RNase。Buffer RL所含試劑成分(fēn)能(néng)解離(lí)RNA與多(duō)糖和(hé)多(duō)酚等代謝(xiè)産物(wù)形成的(≤÷♦de)複合物(wù),使RNA保持遊離(lí)狀态,方便後續操作(zuò)。
預過濾柱-RD有(yǒu)效截留樣品碎塊和(hé)完整性較高(☆ gāo)的(de)基因組DNA;濾液中為(wèi)遊離(lí)的(de₹α)RNA,加入Buffer RBP調整結合條件(jiàn),過濾槍頭去(qù)除可↑♣™>(kě)能(néng)析出的(de)蛋白(bái)和(hé)₩±✘↕多(duō)糖,大(dà)分(fēn)子(zǐ)RNA(包括rRNA和(hé)mRNA)結合至RNA吸附柱-A,大(dà)部分(fēn)小(xiǎo)分(fēn)子(zǐ)RNA(包括tRNA和(hé)降解為(wèi)5S的(de)小(xiǎo)RNA)不(bù)能(néng)被有(yǒu)效吸附而去(qù)除。
四種洗滌液分(fēn)别去(qù)除殘留的(de)雜(z✘γ₩≤á)質:Buffer WAR洗滌去(qù)除殘留的(de)蛋白(bái)、色素;Buffer WD洗滌去(qù)除殘留的(de)小(xiǎo)分(fēn)子(✔•zǐ)DNA、多(duō)糖;Buffer RW2洗滌去(qù)除殘留的(de)鹽;無水(shuǐ)乙醇洗滌'↔去(qù)除殘留的(de)多(duō)酚和(hé)脂溶性色素。最後,用('♠∞yòng)去(qù)離(lí)子(zǐ)水(shuǐ)洗脫ε"獲得(de)高(gāo)純度RNA,最小(xiǎo)洗脫體(tǐ)積15 μl。
産品特點:
成功提取大(dà)部分(fēn)Trizol無法勝任的(de)富含多(duō)糖、色素€ 和(hé)酚類的(de)樣品;
不(bù)使用(yòng)酚和(hé)氯仿等有(yǒu)機(jī)試劑;
新鮮樣品獲得(de)的(de)RNA無明(míng)顯的(de)DNA殘留;
方法簡便,可(kě)在30分(fēn)鐘(zhōng)內(nèi)完成RNA提取工(gōng)作(zuò)。
使用(yòng)RK101從(cóng)水(shuǐ)稻根尖中提取RNA
M:DL2000,1%Agarose;
A1:從(cóng)100mg水(shuǐ)稻根尖中提取RNA;
B1:從(cóng)200mg水(shuǐ)稻根尖中提取RNA;
C1:從(cóng)300mg水(shuǐ)稻根尖中提取RNA;
A2、B2、C2:對(duì)應A1、B1和(hé)C1 60℃水(shuǐ)浴10min,迅速放(fàng)入冰水(shuǐ)浴;
A3、B3、C3:對(duì)應A1、B1和(hé)C1加入RNase後60℃水(shuǐ)浴10min;
實驗結論:
1. 使用(yòng)RK101提取的(de)RNA二級結構未充分(fēn)打開(kāi),加熱(rδ✔€è)能(néng)使二級結構均一(yī)化(huà)♣φ;
2. 大(dà)部分(fēn)小(xiǎo)RNA被去(qù)除,逆轉錄可(kě)減少(shǎo)RNA用(yòng)量,比如(rú)20 μl逆轉錄體(tǐ)系加入0.5 μg RNA。
相(xiàng)關産品