遊離(lí)DNA提取試劑盒

産品簡介

遊離(lí)DNA(或稱循環DNA，以下(xià)簡稱cfDNA)是(shì)一(yī)種無細胞狀态的(de)、片段化(huà)的(de∏♦♠)胞外(wài)DNA，存在于血液、滑膜液和(hé)腦(nǎo)脊液等體(♣∑tǐ)液中，主要(yào)以為(wèi)核小(xiǎo)體(tǐ)的(de)​↕δσ形式存在，片段長(cháng)度主要(yào)為(wèi)178 bp及其倍數(shù)。cfDNA在正常人(rén)的(de)血液中含量甚微(wē<‍i)，平均值為(wèi)13 ng/ml，而當機(jī)體(tǐ)在一(yī)些(xiē)φ≈特殊狀态時(shí)(如(rú)患有(yǒu)腫瘤、自(zì)身(shēn)免 ®♣疫性疾病、感染性疾病、中風(fēng)、心肌梗死及妊娠等)，其含量明(míng)顯上(shàng)升，比如(σ§☆↑rú)惡性腫瘤患者平均值達到(dào)180ng/ml。

适合處理(lǐ)的(de)樣品為(wèi)血清、EDTA-K₂、EDTA-K₃或ACD抗凝的(de)血漿，不(bù)适合處理(lǐ)肝素抗凝的(de)血漿。

    " ;提供負壓抽濾和(hé)離(lí)心過濾兩種γφ方式回收DNA：

      &‌;   &♦©↑nbsp;DK607-01 (50次)：負壓抽濾，最大(dà)處理(lǐ)體(tǐ)積為(wèi)4 ml，輕松獲得(de)≥30 ng cfDNA。。

     &nbs‌αp;    ↑α;DK607-S-50 (50次)：離(lí)心過濾，每次處理(lǐ)200 μl樣品，以孕婦血漿為(wèi)例，可(kě)獲得(dΩ✘≠e)0.8-3.2 ng cfDNA。

産品特點

    ♣₩↑Buffer CFDA可(kě)作(zuò)為(wèi)樣品保存液，方便分(fēn)次采樣和∞÷₹δ(hé)樣品的(de)異地(dì)運輸；

    Buffer CFDA含DNA吸附基質，能(néng)有(yǒu)效去(qù)♥σ ✘除細胞DNA；

    無需添加Carrier RNA，回收率約70-80%(見(jiàn)實驗示例)；

    DNA吸附柱-L6，可(kě)連接30 ml-擴容管，負壓抽濾快(kuài)速完成DNA結合和(hé)洗滌步驟，在台式離(lí)÷₹心機(jī)上(shàng)完成洗脫步驟，最小(xi÷ ∑ǎo)洗脫體(tǐ)積為(wèi)25 μl。

    DNA吸附柱-CS，最小(xiǎo)洗脫體(tǐ)積為(wèi)10 μl。

    cfDNA含量甚微(wēi​•δ)，濃度低(dī)于Nanodrop等微(wē¥☆i)量分(fēn)光(guāng)光(guāng¥↔®)度計(jì)和(hé)常規瓊脂糖凝膠電(diàn)泳檢測下(xià)限，建ε≈ 議(yì)使用(yòng)Qubit熒光(g ↕uāng)計(jì)測定總DNA濃度，使用(yòng)Agilent Bλλγ​ioanalyzer 2100電(dià☆≤n)泳并測定區(qū)域DNA濃度。如(rú)存在大(dà)量細胞DNA，前÷♣‍者明(míng)顯高(gāo)于後者，兩者的(de)比例可(kě₽®)作(zuò)為(wèi)判斷能(néng)否進行"☆(xíng)後續實驗的(de)依據之一(yī)$•♣&。

    改進瓊脂糖凝膠電(diàn)泳•✔±方法可(kě)觀察178 bp核小(xiǎo)₽¥'✘體(tǐ)單位DNA，同時(shí)能(nφγ↕éng)判斷是(shì)否有(yǒu)細胞核染色體(tǐ)≠✘'DNA殘留。電(diàn)泳詳細方法：瓊脂糖凝膠電(diàn)泳鑒定遊離(lí)D₹ε"→NA