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血液RNA&DNA小(xiǎo)量提取試劑盒
試劑盒組成包括血液RNA&DNA保護液(Buffer BR1, Cat#RP601),方便了(le)樣品的(de)分(fēn)次收集、運輸和(hé)保存。
血液樣品與Buffer BR1按照(zhào)1:2.5的(de)比例混合後室溫放(fàng)置2小(xiǎo)時(shí),樣品中的(de)™•ΩDNA和(hé)RNA被固化(huà)為(wèi)容易被離(lí)心沉澱的(deπ♠♠)粉末狀凝集物(wù)。
DNA吸附柱-RD選擇性吸附DNA,保留RNA于濾液中。濾液中加入乙醇調整結合條件(jiàn)後,RNA吸附柱-A有(yǒu)效吸附大(dà)分(fēn)子¥¶(zǐ)RNA (包括mRNA和(hé)rRNA,不(bù)包括tRNA和(hé)降解為(wèi)5S的(de)小(xiǎo)RNA)。
DNA吸附柱-RD和(hé)RNA吸附柱-A分(fēn)别洗滌後,使用(yòng)去(qù÷ )離(lí)子(zǐ)水(shuǐ)或低(dī)鹽★ 溶液分(fēn)别洗脫DNA和(hé)RNA,可(kě)直接用(yòng)于後續實驗。
本試劑盒适合從(cóng)≤1ml新鮮的(de)人(rén)或哺乳動物(w'©×ù)全血,≤3ml凍存的(de)人(rén)或哺乳動物(wù)全血中分(fēn)别提取DNA和(hé)RNA,适合處理(lǐ)的(de)血液為(wèi)EDTA-K2抗凝血,不(bù)适合處理(lǐ)肝素或者檸檬酸抗凝的(de)血液。
RNA産量與應用(yòng): 3-8 μg RNA/ ml新鮮血液,1-2 μg RNA/ ml凍存血液;最小(xiǎo)洗脫體(tǐ)積15 μl。
&nb♣≠"sp; '₹ &nbsδΩ£§p; ≠ &nbs♥£p; 已去(qù)除大(dà)部分(fēn)tRNA和(hé)降解為(wèi)5S的(de)小(xiǎo)RNA,可(kě)直接用(yòng)于5`RACE和(hé)3`RACE。
DNA産量與應用(yòng):5-10 μg DNA/ ml血液;最小(xiǎo)洗脫體(tǐ)積50 μl。
&n∏₹<bsp; &Ω÷Ω£nbsp; &nbε©←₹sp; &≈δπnbsp; §✔ &nק±bsp;  γ"★λ; 純度低(dī)于血液基因組DNA提取系列試劑盒,可(kě)用(yòng)于酶切和(hé)常規®'≈PCR。
本試劑盒也(yě)适合從(cóng)動物(wù)糞便和(hé)✘↑↔軟體(tǐ)動物(wù)腸道(dào)內(nèi)容物(wù)中提取病毒RN♣®σ≠A和(hé)DNA。
生(shēng)理(lǐ)鹽水(shuǐ)分(∑₽fēn)散樣品,離(lí)心上(shàng)清中含病 ∏¶毒RNA和(hé)DNA。離(lí)心上(shàng)清與Buffer ↔$→♥BR1按照(zhào)1:2.5的(de)比例混合後÷∏Ωλ室溫放(fàng)置2小(xiǎo)時(shí),樣品中的∞≤ε (de)DNA和(hé)RNA被固化(huà)為(wèi)容易被離(lí)♣©≠心沉澱的(de)粉末狀凝集物(wù),此過程可(kě)去(qù)除絕♣<λ↓大(dà)部分(fēn)PCR抑制(zhì)成分(☆Ω÷'fēn)。後續操作(zuò)與處理(lǐ)血液樣品相(xiàng✘↓)同。
從(cóng)0.4ml新鮮全血中提取RNA
洗脫體(tǐ)積25 μl,電(diàn)泳體(tǐ)積2 μl,1×TAE,2% agarose,6.7 V/cm 15 min
從(cóng)新鮮血液中獲得(de)的(de)RNA無明(míng)顯的(de)基因組DNA和(hé)5S RNA。
在非變性瓊脂糖凝膠中,28S RNA、18S RNA和(hé)5S RNA≠≥分(fēn)别與2000 bp DNA、750 bp和(&™∞δhé)100 bp DNA遷移率相(xiàng)似。
相(xiàng)關産品